服務介紹
金開瑞提供MTT/ CCK-8 Colony Forming檢測服務， 可用於細胞增殖活性、細胞毒性檢測； 藥物篩選 (包括藥物劑量及給藥時機的篩選， 評價藥物的安全性 等)；活性分子、蛋白抗體、細胞因子等的活性檢測。
服務流程
客戶提供
生長狀態良好的實驗細胞及細胞培養條件（凍存細胞需用幹冰運輸，培養細胞樣品用裝滿培養液的培養瓶寄送，瓶口用封口膜封好）；
需準確告知實驗設計內容，如樣本濃度等，並提供實驗所需藥物等。
最終交付
- 實驗原始數據、圖片、分析結果；
- 實驗流程及完整報告一份。
服務說明
| 服務項目 | 細分 | 服務周期 (工作日) |
| 細胞增殖/細胞毒性 |
MTT |
12 |
|
CCK8 |
||
|
Colony Forming |
30-35 |
案例展示
常見問題與解析 (Q&A)
細胞增殖相關實驗包括有MTT/CCK8、EdU摻入、（軟瓊脂）克隆形成和細胞周期檢測。 MTT/CCK8：一般在基因表達水平幹預、細胞因子或藥物幹預等條件下，培養細胞後加入MTT/CCK8，反應的是細胞總體代謝活力水平，通過多孔板光度計（酶標儀）獲取數值，可繪製細胞的生長曲線。 EdU摻入：在細胞培養過程中EdU，通過DNA合成水平，反應細胞增殖狀態及比例，後續通過熒光顯微鏡或流式細胞儀獲取數據。 （軟瓊脂）克隆形成：不同幹預處理的細胞，在培養孔板中或鋪有低熔點瓊脂糖的培養孔板中，培養2周左右觀察其形成單克隆的能力。軟瓊脂克隆形成主要用於懸浮細胞，或者在研究貼壁細胞的抗失巢凋亡（anoikis）能力時。 細胞周期：實驗細胞經過PI染色後，進行流式細胞術分析，可以獲得細胞在各個細胞周期（G1/G2/M）的分布比例。
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1、 有哪些檢測細胞增殖的方法？
在細胞增殖檢測中，MTT、CCK-8和Colony Forming是常用的方法之一。它們都有各自的優勢和適用範圍，因此使用頻率相對較高。
MTT測定和CCK-8測定是常用的間接評估細胞增殖活性的方法，特別適用於高通量篩選和快速獲得結果。它們在細胞代謝活性的評估方麵比較方便，因此在許多實驗中被廣泛采用。
Colony Forming實驗則用於評估細胞的克隆生成能力和增殖能力，通過直接觀察和計數形成的細胞集落來推斷細胞增殖能力。這種方法在研究細胞增殖能力和克隆性方麵更為直接，常用於細胞生物學和腫瘤學研究中。
其他的細胞增殖檢測方法如BrdU標記、Ki-67免疫染色、流式細胞術和細胞計數等也在特定的研究領域和實驗中得到廣泛應用。
總體而言，選擇使用哪種方法取決於研究的目的、細胞類型、實驗條件以及實驗室的偏好。不同的方法可以提供不同的信息和實驗結果，所以在設計實驗時需要綜合考慮各種因素。
2、 細胞增殖檢測方法的介紹和優劣勢對比
|
方法 |
原理 |
優勢 |
劣勢 |
| MTT測定 |
細胞將MTT溶液還原為紫色結晶體， 通過溶解和測量吸光度評估細胞增殖活性 |
簡單、成本低、適用於高通量篩選 | 不能直接確定細胞數量，耗時 |
| CCK-8測定 |
細胞將CCK-8溶液中的染料還原為有顏色的產物， 通過測量吸光度評估細胞增殖活性 |
快速、簡便、適用於高通量篩選 | 不能直接確定細胞數量，對少量細胞可能不敏感 |
| Colony Forming | 細胞形成集落，通過計數集落數量評估細胞增殖能力 | 直接評估細胞克隆生成能力和增殖能力 | 較長培養時間，依賴細胞克隆生成能力 |
| BrdU標記 |
細胞在培養基中攝取BrdU， 通過檢測BrdU存在來評估正在進行DNA複製的細胞 |
直接標記正在進行DNA複製的細胞 | 需要特定抗體，不能區分細胞階段 |
| Ki-67免疫染色 | 檢測細胞中Ki-67蛋白的表達，其在細胞增殖過程中高表達 | 直接標記正在進行細胞增殖的細胞 | 不能區分細胞階段，依賴特定抗體 |
| 流式細胞術 | 利用流式細胞儀檢測細胞數量、大小和DNA含量等參數 | 快速、可獲取多個參數信息 | 對設備要求較高，需要單個細胞懸浮 |
| 細胞計數 | 通過顯微鏡觀察和手工計數細胞數量來確定細胞增殖 | 直接計數細胞數量 | 耗時，適用於少量細胞和小培養皿 |
3、 當涉及到細胞增殖檢測方法的使用時，一些常見的研究領域和實驗應用的示例
①腫瘤學研究：
▶ TT測定：評估腫瘤細胞係對抗腫瘤藥物的敏感性和抗藥性。
▶ Colony Forming：評估腫瘤幹細胞的克隆生成能力和增殖能力。
▶ Ki-67免疫染色：檢測腫瘤組織中Ki-67的表達水平，評估腫瘤細胞的增殖活性。
②藥物篩選和毒性研究：
▶ CCK-8測定：進行高通量篩選，評估化合物對細胞增殖的影響。
▶ 流式細胞術：測定細胞周期分布，判斷藥物對細胞周期的影響。
▶ MTT測定：評估藥物或化合物的細胞毒性作用。
③組織工程和再生醫學：
▶ Colony Forming：評估幹細胞的增殖和分化能力，用於組織工程和再生醫學研究。
▶ 細胞計數：計算細胞數量以確定組織工程支架的細胞種植密度。
④免疫學研究：
▶ BrdU標記：標記正在進行DNA複製的免疫細胞，評估免疫細胞增殖活性。
▶ Ki-67免疫染色：檢測免疫細胞中Ki-67的表達，評估其增殖能力和激活狀態。
這些隻是一些示例，實際上在各個研究領域和實驗中可以使用不同的細胞增殖檢測方法。選擇合適的方法需要考慮研究問題、細胞類型和實驗條件等因素，並根據實驗目的進行決策。
