服務介紹
ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一種常見的免疫學檢測技術，可用於檢測血清、唾液、尿液等生物樣本中的蛋白質、抗體等分子。該技術基於特異性抗原與抗體的結合反應，利用酶標記的二抗或底物進行檢測。ELISA有直接ELISA、間接ELISA、競爭ELISA等不同類型，具有高靈敏度、特異性和可重複性，廣泛應用於醫學、生命科學、環境監測等領域。
服務優勢
- 高靈敏度：ELISA可以檢測非常低濃度的目標物質，通常在皮克克或納克克級別，使其在許多應用中具有很高的檢測敏感性。
- 高特異性：ELISA使用特異性的抗體或抗原對目標物質進行識別和捕捉，從而可以準確地檢測和區分目標物質，具有較低的交叉反應性。
- 寬泛的應用範圍：ELISA技術適用於檢測和測量各種類型的生物分子，如蛋白質、抗體、抗原、激素、藥物等，廣泛應用於生物醫學研究、臨床診斷和藥物開發等領域。
- 高通量性：ELISA可以同時處理多個樣品，通過使用多孔板或高通量讀數設備，可以快速高效地進行大規模樣品處理和分析。
- 可定量性：ELISA技術可通過與標準曲線進行比較，對目標物質的濃度進行定量分析，提供可靠的定量結果。
- 可重複性和穩定性：ELISA的實驗結果具有良好的重複性和穩定性，可以在不同實驗室和不同時間點進行重複驗證，結果具有一致性。
服務流程
客戶提供
需檢測的樣品（培養上清、血清、血漿等），需-20℃保存，避免反複凍融；
抗原（抗原鑒定需提供），需提供足量抗原，對抗原的純度及質量要求將依據實驗要求進行商討後決定；
抗體（抗體鑒定需提供），需提供足量一抗（或由金開瑞代為購買），同時請提供商業抗體的詳細說明書，便於我們按照說明書要求精確實驗；
其他信息，包括：1、標本編號；2、所測項目；3、是否做複孔； 4、實驗後標本是否寄回； 您無需提供二抗，為了保證試驗順利準確，您所提供的抗體、抗原信息務必準確詳細，我們的工作人員會按照ELISA標準的SOP流程操作。
最終交付
- 檢測實驗報告。
服務說明
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服務項目 |
細分 | 服務周期（工作日） |
| ELISA檢測 |
血清、細胞上清 |
7-10（視樣本） |
相關資源
1、ELISA實驗檢測步驟
● 塗覆：將特異性抗體或抗原溶液加入到微孔板中，並通過吸附或共價結合的方式將其固定在孔板表麵。
● 阻斷：加入阻斷緩衝液，防止非特異性結合。
● 樣品加入：加入待測樣品，使其與固定在孔板上的特異性抗體或抗原結合。
● 洗滌：使用洗滌緩衝液洗去未結合的物質。
● 檢測：加入酶標記的二抗，使其與待測物結合。
● 洗滌：再次使用洗滌緩衝液洗去未結合的物質。
● 底物添加：加入底物溶液，使其與酶標記的二抗反應，產生可測量的信號。
● 反應停止：加入停止液停止底物反應。
● 讀取結果：使用酶標儀或光度計測量反應產生的顏色強度或發光強度。
2、ELISA實驗結果不如預期是什麼原因？
（1）低信號/陰性結果：
▶ 樣品處理問題：可能存在樣品稀釋不當、保存不當、存在幹擾物質等。
▶ 抗體質量問題：使用的抗體可能與目標物質結合不充分或不特異。
▶ 實驗操作問題：可能存在洗滌不徹底、孵育時間過短等實驗操作不準確的問題。
（2）高背景/假陽性結果：
▶ 阻斷問題：阻斷步驟不充分，導致非特異性結合。
▶ 抗體交叉反應：使用的抗體可能與其他非目標物質發生交叉反應。
▶ 樣品汙染：存在非特異性的樣品汙染，如細胞碎片、大量蛋白質等。
（3）結果變異性：
▶ 實驗條件問題：實驗條件（如溫度、濕度、孵育時間）的不一致性可能導致結果的變異性。
▶ 實驗重複性問題：可能存在實驗操作的差異或者試劑批次的差異，影響結果的一致性。
（4）非線性結果：
▶ 標準曲線問題：標準曲線的製備可能存在誤差，導致濃度計算不準確。
▶ 高濃度樣品稀釋問題：如果使用高濃度的樣品進行稀釋，稀釋比例選擇不當可能導致非線性結果。
3、ELISA技術的具體應用及例子
● 血清抗體ELISA：用於檢測血清中特定病原體抗體，如HIV抗體ELISA、乙肝表麵抗原抗體ELISA等。
● 腫瘤標誌物ELISA：用於檢測血清或組織中的腫瘤標誌物，如癌胚抗原（CEA）ELISA、前列腺特異性抗原（PSA）ELISA等。
● 細胞因子ELISA：用於的存在和濃度，如腫瘤壞死因子（TNF）ELISA、白介素-6（IL-6）ELISA等。
● 免疫球蛋白ELISA：用於定量檢測血清中的免疫球蛋白類別和濃度，如IgG ELISA、IgM ELISA等。
● 細胞表麵受體ELISA：用於檢測細胞表麵受體的存在和表達水平，如CD4 ELISA、CD44 ELISA等。
● 標簽蛋白ELISA：用於檢測特定標簽蛋白的存在和濃度，如葡萄糖氧化酶（HRP）ELISA、堿性磷酸酶（AP）ELISA等。
● 組織特異性蛋白ELISA：用於檢測組織特異性蛋白的存在和表達水平，如神經元特異性蛋白（NSE）ELISA、心肌肌鈣蛋白（cTnI）ELISA等。
● 激素ELISA：用於檢測血清中的激素水平，如雌激素ELISA、甲狀腺素ELISA等。
