服務介紹
普通引物是指在PCR反應中作為引導DNA擴增的引物，通常由18-25個堿基組成，可以與目標DNA序列特異性結合，並提供DNA聚合酶催化合成新DNA鏈所需的3'端。普通引物通常用於常規PCR反應中，包括基因表達分析、病原體檢測、基因型鑒定等應用。普通引物的合成和設計非常常見和標準化，通常可以在引物庫中找到現成的引物，也可以根據需要定製合成，具有成本低、操作簡便等優點。引物合成可用於PCR、測序、全基因合成、亞克隆、點突變、載體構建、RNA幹擾和基因重組等實驗。根據不同的用途，可選擇不同的純化方式。
服務優勢
- 先進：采用世界上先進的合成儀製造商BLP 公司生產的nm級別的Dr.oligo192高通量DNA合成儀，使引物合成更快速、更安全、更穩定；
- 快速：3h內可以合成192條30個堿基以內的引物；常規RPC、DSL、OPC純化引物24h內發貨，武漢地區次日即可交付；
- 安全：采用氣相氨解的原理，改進的氨解方式，可以在90min內使引物氨解的更快更完全，並且避免由於其他試劑氨解帶來的不必要的突變；
- 優質：多種純化方式，多重質量檢測手段（HPLC、MS），全麵保證我們發貨的質量。
服務流程
客戶提供
引物合成訂購表：需詳細填寫客戶信息、序列、堿基數、純化方式等信息。
最終交付
- 對應合成量的引物凍幹粉；
- 引物操作說明書。
服務說明
| 純化方式 | 引物長度 | 產量(OD) | 發貨時間 |
| RPC純化 | 8-15nt |
1-2 |
1工作日 |
| 2-4 | 1工作日 | ||
| 15-59nt |
1-4 |
1工作日 | |
| 5-10 | 1工作日 | ||
| 10-15 | 1工作日 | ||
| 15-20 | 1工作日 | ||
| ＞20 | 1工作日 | ||
| 60-120nt | 1-2 | 3工作日 | |
| 2-5 | 3工作日 | ||
| ＞5 | 3工作日 | ||
| PAGE純化 | 15-59nt |
1-2 |
3工作日 |
| 3-4 | 3工作日 | ||
| 5-8 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 60-80nt | 1-2 | 3工作日 | |
| 3-4 | 3工作日 | ||
| 5-8 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 80-100nt | 3 | 3工作日 | |
| 3 | 3工作日 | ||
| 3 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 100-120nt | 1 | 3工作日 | |
| 2 | 3工作日 | ||
| HPLC純化 | 8-15nt |
1-2 |
3-5工作日 |
| 3-4 | 3-5工作日 | ||
| 15-59nt | 1-4 | 3-5工作日 | |
| 5-8 | 3-5工作日 |
常見問題與解析 (Q&A)
兩條引物退火成功率達不到百分之百，裏麵會存在單鏈引物，引物退火後跑膠有雜鏈很正常，不能以此來判斷單鏈引物純度。
基因合成，尤其是難度基因和長片段基因，有可能造成延期，因此我們隻能保證絕大多數基因按期交付。對於延期項目，我們的技術支持會給您及時彙報進展。目前並沒有任何公司保證延期後減免費用
相關資源
1、引物合成實驗中的專屬名詞及解釋
● Oligo（Oligonucleotide）：Oligo是指短鏈的寡聚核苷酸，通常由20到200個堿基組成。在引物合成實驗中，引物往往是一種特定長度的oligo。
● 反向合成（Reverse Synthesis）：在引物合成實驗中，反向合成指從3'端到5'端逐個加入核苷酸單元，合成引物的過程。
● 脫保護（Deprotection）：在引物合成中，引物的核苷酸單元通常被保護基團保護，以防止在反應過程中發生意外的化學反應。脫保護是指去除這些保護基團的過程，使得引物的核苷酸單元可用於進一步的化學反應。
● HPLC（High-Performance Liquid Chromatography）：高效液相色譜法，一種常用的分離和純化技術，可用於分離和純化合成的引物。
● PAGE（Polyacrylamide Gel Electrophoresis）：聚丙烯酰胺凝膠電泳法，一種常用的DNA片段分析技術，可以用於評估引物的純度和大小。
2、引物的保存與使用注意事項
● 引物保存的注意事項：
▶ 儲存溫度：將引物儲存在幹燥的條件下，通常在-20°C或更低的溫度下。避免頻繁的凍融循環，因為這可能導致引物的降解。
▶ 避光保護：引物應儲存在避光的條件下，以防止光照引發的降解反應。使用不透明的冷凍管或管盒來保護引物。
▶ 防潮防濕：確保引物儲存環境幹燥，避免濕氣的進入。可以使用幹燥劑或密封性良好的儲存容器來防止濕氣侵入。
● 引物使用的注意事項：
▶ 引物質量控製：在使用引物之前，進行引物的質量控製驗證，如測序確認引物序列的準確性或質譜分析驗證純度。
▶ 合理稀釋：根據實驗需求，合理稀釋引物至適當的工作濃度。確保稀釋過程中的準確度和標記清晰度。
▶ 正確溫度：在實驗中，根據引物的要求和擴增反應的最佳溫度，嚴格控製反應溫度。避免超過引物的最大耐受溫度。
▶ 避免汙染：使用無菌技術和無菌操作條件，避免引物受到外源性的汙染。使用專用的無菌技術器材和操作區域。
▶ 單次使用：為避免引物的降解和汙染，一次性使用所需量的引物，並避免重複凍融。
3、引物合成的實驗舉例
● PCR（聚合酶鏈式反應）：PCR是一種常用的基因擴增技術，引物在PCR反應中用於選擇性地擴增目標DNA序列。
● 實時定量PCR（qPCR）：qPCR用於準確測量目標DNA或RNA的數量，引物在qPCR實驗中用於擴增目標序列並進行定量分析。
● DNA測序：引物在DNA測序中用於擴增待測序列的片段，以便進行測序反應。
● RNA pull-down：RNA pull-down實驗用於研究RNA與蛋白質的相互作用。引物在該實驗中用於捕獲目標RNA分子，並與其結合的蛋白質一起純化和分析。
● 基因突變分析：引物在基因突變分析中用於擴增目標基因的特定區域，以便進行突變檢測和分析。
● 基因克隆：引物在基因克隆中用於擴增目標基因的特定區域，以便將其插入到表達載體或矢量中。
● 限製性片段長度多態性（RFLP）分析：引物在RFLP分析中用於擴增目標基因的特定區域，以便進行限製性酶切並分析不同基因型的片段長度差異。
4、用於引物合成設計、分析和操作的在線工具簡介
● Primer3 ：Primer3常用的在線引物設計工具，可以根據用戶提供的目標序列信息，自動設計適合的引物序列，並提供引物參數和特性分析。（primer3.ut.ee）
● IDT SciTools ：IDT SciTools提供了多個在線工具，包括引物設計、引物分析、序列優化和酶切位點分析等。其中包括了引物設計、Tm值計算、二聚體結構預測等功能。（idtdna.com/pages/tools）
● OligoAnalyzer：OligoAnalyzer是IDT提供的在線工具，用於分析引物的理化特性，包括Tm值、二聚體結構、GC含量、末端穩定性等。（idtdna.com/pages/tools/oligoanalyzer）
● NCBI Primer-BLAST：NCBI Primer-BLAST是由國家生物技術信息中心（NCBI）提供的在線工具，用於引物設計和特異性分析。它可以設計引物，並對其在基因組中的特異性進行評估。（ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/）
● UCSC In-Silico PCR：UCSC In-Silico PCR是UCSC基因組瀏覽器提供的在線工具，可以通過輸入引物序列，在基因組上進行虛擬PCR，並可視化PCR產物的位置。（genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgPcr）
● SnapGene：SnapGene是一款商業軟件，提供了在線版本和桌麵版本。它可以用於引物設計、序列編輯、限製性酶切模擬和克隆操作等。在線版本允許用戶進行一些基本的引物設計和序列分析操作。（snapgene.com）
